抗体特性解析用酵素

ACROBiosystemsは複数の酵素を開発し、抗体とそのPTMの特性評価を支援しています。

2023/07/23

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背景
バイオ医薬品として使用される治療用抗体は、分子構造が複雑であるため、製造時に厳しい監視と管理が必要です。生物学的医薬品としての性質により、安全性や製品のばらつきは懸念されます。このように、製品の品質を分析し、特徴付けるためには、包括的で精密なワークフローを導入する必要があります。モノクローナル抗体製品は、mAb、Fc融合、Fab、抗体薬物複合体、二重特異性mAb(bsAbs)、二重特異性T細胞エンゲージャー(BiTE)など、承認が年々増えており、それぞれの翻訳後修飾(PTM)を理解することができれば、製造した抗体のin vivo有効性や薬物動態、作用機構についてより良い洞察と予測も可能となります。
Absの特性解析は、トップダウン解析(全体構造)、ボトムアップ解析(ペプチドシークエンス)、そしてミドルレベル解析(Fc、Fv、PTM)など、いくつかの方法から行われるのが一般的です。抗体の特性評価法を可能にするため、ACROBiosystemsは複数の酵素を開発し、抗体とそのPTMの特性評価を支援しています。

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糖鎖分析用ツール

N-結合型糖鎖の構造や種類は、モノクローナル抗体(mAb)やFc融合タンパク質などの治療用タンパク質の免疫原性、薬物動態、薬力学に影響を与えることがあります。
Endo HやEndo Sなどの酵素は、N-結合型糖鎖の種類に応じた切断を行い、その後の解析を可能にします。
Endo H (500U/μl) (Cat .No. ENH-S5116) 使用例:
Endo Hはアスパラギン結合(N結合)のハイブリッドまたは高マンノースオリゴ糖を切断するが、複合オリゴ糖は切断しない。
高マンノースまたはハイブリッド型N型糖鎖の切断   特長:
特異的に機能する: 複合糖鎖は切断しない
SDS-PAGEで測定した純度≧95%
最適なpH値:5-6
反応時間:1時間   Endo S (200U/μl) (Cat .No. ENS-S5143) 使用例:
Endo Sは複雑なオリゴ糖を優先的に切断し、アスパラギン結合(N-結合)したハイブリッドオリゴ糖や高マンノースオリゴ糖の切断は回避する。
複合型糖鎖を切断する。高マンノース型およびハイブリッド型糖鎖に対する活性は制限されている。   特長:
高効率IgG特異的エンドグリコシダーゼ
SDS-PAGEで測定した純度≧95%
反応時間:30分間

抗体サブユニットの断片化
SpeB (40U/μl) (Cat. No. SPB-S5115)
使用例:
SpeB酵素はIgGを消化してFabとFcの断片を生成する。精製された均質なFab断片は、下記のような用途に使用することができます:
Fab断片の抗原への一価結合に関する研究
Fcを介したエフェクター機能の排除
Fc相互作用による非特異的結合を低減する

特長:
切断部位 (ヒト IgG1): KTHT / CPPCPAP (ヒンジの上流)
反応時間:60分間

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